Associação entre a produção de partículas de papilomavírus humano e a gravidade da papilomatose respiratória recorrente

Nov 21, 2023

Scientific Reports volume 13, Número do artigo: 5514 (2023) Citar este artigo

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A papilomatose respiratória recorrente (PRR) tem uma ampla gama de gravidade. Investigamos a relação entre a produção de partículas do papilomavírus humano (HPV) e a gravidade da PRR. De setembro de 2005 a junho de 2021, foram incluídas 68 amostras de PRR (de 29 pacientes). O tipo de HPV foi determinado. A carga viral do HPV, o estado físico e as características demográficas e clínicas foram avaliadas. Imuno-histoquímica (IHC) foi realizada para p16, Ki-67, L1 e E4. Usamos NanoSuit-CLEM (microscopia correlativa de luz e eletrônica) e microscopia eletrônica de transmissão (TEM) para examinar as amostras. O número total de cirurgias em casos positivos e negativos para HPV foi de 3,78 (n = 55/68, intervalo: 1–16) e 1,30 (n = 13/68, intervalo: 1–3), respectivamente (p = 0,02 ). IHC mostrou que L1 e E4 foram correlacionados e expressos na superfície do tumor. NanoSuit-CLEM e TEM revelaram partículas de HPV em núcleos L1-positivos. Os casos L1 IHC-positivos tiveram intervalo cirúrgico menor (p < 0,01) e cirurgias mais frequentes (p = 0,04). P16 IHC, carga viral e estado físico não foram associados à gravidade da doença. Este estudo visualizou a produção de partículas de HPV em RRP pela primeira vez. A infecção persistente por partículas de HPV foi associada à gravidade. Sugerimos L1 IHC para avaliar a gravidade da PRR, além do escore de Derkay.

A papilomatose respiratória recorrente (PRR) é um tumor benigno frequentemente causado pelo papilomavírus humano (HPV) tipo 6 ou 111,2. A PRR também é conhecida como papilomatose laríngea (LP)3. Em geral, o envolvimento do HPV é relatado em 80–96,9% dos pacientes4,5,6; no entanto, alguns estudos relataram menor taxa de detecção de HPV, aproximadamente 60%1,2. Além disso, alguns relatórios não examinaram o envolvimento do HPV7,8,9. Alguns pacientes permanecem em remissão após uma única cirurgia, enquanto outros desenvolvem transformação maligna após múltiplas cirurgias e apresentam resultados desfavoráveis10,11. O escore de Derkay, que avalia a gravidade da doença com base nos achados clínicos, é frequentemente usado para determinar a gravidade da PRR12. No entanto, poucos estudos foram realizados para investigar a gravidade clínica da doença com base em sua patogênese, como o ciclo de vida do HPV. Como o DNA do HPV é detectado na mucosa laríngea de pacientes em remissão, acredita-se que a infecção persistente pelo HPV esteja envolvida na patogênese da RRP13. No entanto, nenhum relatório examinou a associação entre o envolvimento do HPV (ou o estado das partículas do HPV produzidas pelos tumores) e a gravidade da doença.

O método NanoSuit é uma técnica biomimética inspirada na capacidade de observar larvas vivas de Drosophila usando um microscópio eletrônico de varredura por emissão de campo (FE-SEM), que requer condições de alto vácuo14,15. O método NanoSuit-CLEM (microscopia correlativa de luz e eletrônica), que aplica a tecnologia NanoSuit, é uma técnica que forma uma nanomembrana sobre tecidos patológicos, preservando assim o teor de água do tecido e mantendo sua estrutura tridimensional, enquanto a área sob observação microscópica óptica é observada com um SEM16. O processo pode ser concluído em poucos minutos e a observação FE-SEM pode ser realizada facilmente. Anteriormente, examinamos vários tecidos patológicos, como o trato gastrointestinal e a glândula salivar, usando o método NanoSuit-CLEM17,18,19. Além disso, relatamos anteriormente métodos padrão de observação para vários vírus, como citomegalovírus, vírus varicela zoster e HPV, usando o método NanoSuit-CLEM20.

Foi relatado que as expressões de mRNA de HPV E4 e E5 são elevadas em PRR e podem estar envolvidas na patogênese da doença21,22. Assim, levantamos a hipótese de que a produção ativa de partículas de HPV estaria associada à gravidade da PRR porque o E4 está envolvido na formação e liberação de partículas de HPV.

Neste estudo, tentamos elucidar o ciclo de vida do HPV em RRP observando as partículas do HPV usando o método NanoSuit-CLEM. Além disso, pretendemos mostrar que a produção ativa de partículas de HPV está associada à gravidade da doença.